Імуноферментний аналіз (ІФА, ELISA) або, точніше, ферментний імуносорбентний аналіз (англ. enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA) — імунологічний метод для визначення наявності певних антигенів, шляхом реакції антиген-антитіло. Широко використовується в науково-дослідній роботі та клінічній лабораторній діагностиці. Вперше був описаний у 1971 році.
ELISA | |
---|---|
Мікротитрувальна плашка на 96 лунок, що застосовується для проведення ELISA. | |
MeSH | D004797 |
Загальний принцип ELISA
Основний принцип ELISA — реакція антиген-антитіло. Якщо антиген (молекула-мішень) являє собою білок, то його очищений препарат звичайно використають для одержання антитіл, за допомогою яких потім і виявляють дану мішень. Раніше використовувались первинні антитіла, що були за своєю природою поліклональними. Розробка і застосування моноклональних антитіл дало змогу значно покращити специфічність імуноферментного аналізу.
Процедура
Існує цілий ряд підходів, що дозволяють визначити, чи відбулося зв'язування антитіла з антигеном-мішенню. Один з них — це ферментний іммуносорбентний аналіз (ELISA), що часто використовується для діагностики різноманітних антигенів.
![image](https://www.wikidata.uk-ua.nina.az/image/aHR0cHM6Ly93d3cud2lraWRhdGEudWstdWEubmluYS5hei9pbWFnZS9hSFIwY0hNNkx5OTFjR3h2WVdRdWQybHJhVzFsWkdsaExtOXlaeTkzYVd0cGNHVmthV0V2WTI5dGJXOXVjeTkwYUhWdFlpODBMelJpTDBWTVNWTkJMWE5oYm1SM2FXTm9Mbk4yWnk4ME1EQndlQzFGVEVsVFFTMXpZVzVrZDJsamFDNXpkbWN1Y0c1bi5wbmc=.png)
- Підготовка підкладки для фіксації досліджуваного зразка;
- Зразок, у якому хочуть виявити специфічну молекулу або мікроорганізм, фіксують на твердій підкладці, наприклад на пластиковій мікротитрувальній плашці, що зазвичай має 96 лунок;
- До фіксованого зразка додають антитіло, специфічне до маркерної молекули (первинне антитіло), потім промивають лунку, щоб видалити молекули первинного антитіла, які не зв'язалися;
- Додають вторинне антитіло, що специфічно зв'язується з первинним і не взаємодіє з маркерною молекулою. До цього антитіла приєднаний фермент (наприклад, лужна фосфатаза, або уреаза), що може каталізувати перетворення незабарвленого субстрату в забарвлений продукт. Промивають лунку, щоб видалити молекули, які не зв'язалися;
- Додають незабарвлений субстрат, що впізнається та утилізується ферментом;
- Проводять якісне або кількісне визначення пофарбованого продукту, за допомогою оцінки оптичної щільності.
Застосування
Ферментний імуносорбентний аналіз широко застосовується для діагностики різноманітних інфекційних захворювань, ракових процесів (в основному завдяки специфічним білкам і пептидам), визначення концентрації різноманітних низькомолекулярних сполук, таких як токсини, лікарські засоби тощо.
Застосування під час коронавірусної пандемії 2020
У 2020 році було запропоновано проводити тести, щоб визначити наявність антитіл до коронавірусу SARS-CoV-2.
В Україні тести ІФА-тести було завезено в кінці квітня 2020 року. 5 травня міністр охорони здоров'я Максим Степанов скликав нараду, на якій збираються вирішити як і кого тестувати такими тестами в Україні.
Джерела
- Б. Глік, Дж. Пастернак, Молекулярна біотехнологія, Москва, Мир, 2002.(С.?)
Примітки
- Engvall, E (22 листопада 1972). . The Journal of Immunology. 109 (1): 129—135. ISSN 0022-1767. PMID 4113792. Архів оригіналу за 5 серпня 2020. Процитовано 13 червня 2020.
- Перші тестування на антитіла до COVID-19 будуть проведені в Одеській і Сумській областях [ 24 лютого 2022 у Wayback Machine.], Рубрика, 28 квітня 2020
- МОЗ ще думає як використовувати ІФА-тести, в регіони нічого не розподілялося, - міністр, Рубрика, 4 травня 2020
Посилання
- ІМУНОФЕРМЕНТНИЙ АНАЛІЗ [ 3 серпня 2016 у Wayback Machine.] //Фармацевтична енциклопедія
- Анімована ілюстрація проходження аналізу
- Анімоване навчання [ 12 жовтня 2007 у Wayback Machine.]
- Про ELISA [ 13 березня 2012 у Wayback Machine.]
![]() | Це незавершена стаття з медицини. Ви можете проєкту, виправивши або дописавши її. |
Вікіпедія, Українська, Україна, книга, книги, бібліотека, стаття, читати, завантажити, безкоштовно, безкоштовно завантажити, mp3, відео, mp4, 3gp, jpg, jpeg, gif, png, малюнок, музика, пісня, фільм, книга, гра, ігри, мобільний, телефон, android, ios, apple, мобільний телефон, samsung, iphone, xiomi, xiaomi, redmi, honor, oppo, nokia, sonya, mi, ПК, web, Інтернет
U Vikipediyi ye statti pro inshi znachennya cogo termina IFA znachennya Imunofermentnij analiz IFA ELISA abo tochnishe fermentnij imunosorbentnij analiz angl enzyme linked immuno sorbent assay ELISA imunologichnij metod dlya viznachennya nayavnosti pevnih antigeniv shlyahom reakciyi antigen antitilo Shiroko vikoristovuyetsya v naukovo doslidnij roboti ta klinichnij laboratornij diagnostici Vpershe buv opisanij u 1971 roci ELISAMikrotitruvalna plashka na 96 lunok sho zastosovuyetsya dlya provedennya ELISA MeSH D004797 redaguvati u Vikidanih Zagalnij princip ELISAOsnovnij princip ELISA reakciya antigen antitilo Yaksho antigen molekula mishen yavlyaye soboyu bilok to jogo ochishenij preparat zvichajno vikoristayut dlya oderzhannya antitil za dopomogoyu yakih potim i viyavlyayut danu mishen Ranishe vikoristovuvalis pervinni antitila sho buli za svoyeyu prirodoyu poliklonalnimi Rozrobka i zastosuvannya monoklonalnih antitil dalo zmogu znachno pokrashiti specifichnist imunofermentnogo analizu ProceduraIsnuye cilij ryad pidhodiv sho dozvolyayut viznachiti chi vidbulosya zv yazuvannya antitila z antigenom mishennyu Odin z nih ce fermentnij immunosorbentnij analiz ELISA sho chasto vikoristovuyetsya dlya diagnostiki riznomanitnih antigeniv Shema provedennya analizu Pidgotovka pidkladki dlya fiksaciyi doslidzhuvanogo zrazka Zrazok u yakomu hochut viyaviti specifichnu molekulu abo mikroorganizm fiksuyut na tverdij pidkladci napriklad na plastikovij mikrotitruvalnij plashci sho zazvichaj maye 96 lunok Do fiksovanogo zrazka dodayut antitilo specifichne do markernoyi molekuli pervinne antitilo potim promivayut lunku shob vidaliti molekuli pervinnogo antitila yaki ne zv yazalisya Dodayut vtorinne antitilo sho specifichno zv yazuyetsya z pervinnim i ne vzayemodiye z markernoyu molekuloyu Do cogo antitila priyednanij ferment napriklad luzhna fosfataza abo ureaza sho mozhe katalizuvati peretvorennya nezabarvlenogo substratu v zabarvlenij produkt Promivayut lunku shob vidaliti molekuli yaki ne zv yazalisya Dodayut nezabarvlenij substrat sho vpiznayetsya ta utilizuyetsya fermentom Provodyat yakisne abo kilkisne viznachennya pofarbovanogo produktu za dopomogoyu ocinki optichnoyi shilnosti ZastosuvannyaFermentnij imunosorbentnij analiz shiroko zastosovuyetsya dlya diagnostiki riznomanitnih infekcijnih zahvoryuvan rakovih procesiv v osnovnomu zavdyaki specifichnim bilkam i peptidam viznachennya koncentraciyi riznomanitnih nizkomolekulyarnih spoluk takih yak toksini likarski zasobi tosho Zastosuvannya pid chas koronavirusnoyi pandemiyi 2020 Dokladnishe Pandemiya koronavirusnoyi hvorobi 2019 U 2020 roci bulo zaproponovano provoditi testi shob viznachiti nayavnist antitil do koronavirusu SARS CoV 2 V Ukrayini testi IFA testi bulo zavezeno v kinci kvitnya 2020 roku 5 travnya ministr ohoroni zdorov ya Maksim Stepanov sklikav naradu na yakij zbirayutsya virishiti yak i kogo testuvati takimi testami v Ukrayini DzherelaB Glik Dzh Pasternak Molekulyarna biotehnologiya Moskva Mir 2002 S PrimitkiEngvall E 22 listopada 1972 The Journal of Immunology 109 1 129 135 ISSN 0022 1767 PMID 4113792 Arhiv originalu za 5 serpnya 2020 Procitovano 13 chervnya 2020 Pershi testuvannya na antitila do COVID 19 budut provedeni v Odeskij i Sumskij oblastyah 24 lyutogo 2022 u Wayback Machine Rubrika 28 kvitnya 2020 MOZ she dumaye yak vikoristovuvati IFA testi v regioni nichogo ne rozpodilyalosya ministr Rubrika 4 travnya 2020PosilannyaIMUNOFERMENTNIJ ANALIZ 3 serpnya 2016 u Wayback Machine Farmacevtichna enciklopediya Animovana ilyustraciya prohodzhennya analizu Animovane navchannya 12 zhovtnya 2007 u Wayback Machine Pro ELISA 13 bereznya 2012 u Wayback Machine Ce nezavershena stattya z medicini Vi mozhete dopomogti proyektu vipravivshi abo dopisavshi yiyi