Рекомбінантна ДНК (англ. recombinant DNA, англ. rDNA) — молекула ДНК, отримана за допомогою методів генетичної інженерії (молекулярне клонування). Молекула поєднує в собі генетичний матеріал, виділений з різних біологічних джерел, створюючи таким чином певну ДНК послідовність. Отримана таким чином векторна ДНК може реплікуватись у клітинах-господарях. Векторами для рекомбінантної ДНК можуть бути плазміди, віруси, на основі дріжджових чи тваринних хромосомальних елементів. Існує велика кількість різних систем, що дозволяють здійснювати експресію привнесених генів. Окрім загальної назви «рекомбінантна ДНК», таку молекулу іноді називають химерною ДНК. В технології рекомбінантної ДНК загалом використовують , котра після відповідних маніпуляціях має тупі та липкі кінці. За допомогою технології рекомбінантної ДНК можливо привнести в геном одного організму певний ген, виділений з геному іншого організму, створюючи таким чином генетично модифікований організм. Технологія рекомбінантної ДНК і генетична рекомбінація є різними поняттями.
Білки, синтезовані в результаті експресії рекомбінантної ДНК називаються . Інколи, під час присутності привнесеної молекули ДНК в геномі, експресія протеїну не відбувається. В цьому випадку вимагається використання специфічних векторних систем та певної структури ДНК конструкції (присутність специфічних промоторів, термінаторів тощо)
Історія
Вперше ідея про створення рекомбінантної ДНК виникла у Пітера Лоббана, аспіранта професора Дейла Кайзера з факультету біохімії при медичній школі Стенфордського університету.Перші публікації про створення та вдале використання рекомбінантної ДНК датовані 1972 та 1973 рр.. Після цього, Стенфордський університет у 1974 р. подав заявку на патент за темою «Рекомбінантна ДНК» за згодою інвесторів Стенлі Коена та Герберта Боєра. Патент був затверджений у 1980 р. Першим продуктом, отриманим з використанням технології рекомбінантних ДНК був людський інсулін, створений компанією Genetech та ліцензованим Eli Lilly and Company.
Технологія створення рекомбінантної ДНК
Для створення молекули рекомбінантної ДНК необхідно пройти декілька етапів:
- виділення потрібного (цільового) гена
- вбудова гена в специфічну ДНК послідовність (вектор), здатну до реплікації в клітині-хазяєві
- введення вектора в організм-реципієнт
- визначення (скринінг) та відбір клітин, в геномі яких виявлена присутність гена інтересу
Створення рекомбінантної ДНК відбувається завдяки методу молекулярного клонування. Це є неосновний метод, але найбільш поширений. Тож, спочатку за допомогою рестриктаз отримують різного роду фрагменти ДНК, в тому числі й послідовності, що кодують гени. Фрагменти ДНК можуть мати як тупі так і липкі кінці. В результаті, різноманітні фрагменти ДНК можливо комбінувати між собою за допомогою різноманітних методів, наприклад методом рестрикційно/лігазного методу, ([en]) та ін. Після введення чужорідної ДНК у геном організму-господаря, рекомбінантна ДНК-конструкція може експресуватись. В деяких випадках експресія не відбувається.
Примітки
- Lear, J. (1978). Recombinant DNA: The Untold Story. New York: Crown Publishers. p. 43.
- PMID 4342968 (PMID 4342968)
Бібліографічний опис з'явиться автоматично через деякий час. Ви можете підставити цитату власноруч або використовуючи бота. - PMID 4754844 (PMID 4754844)
Бібліографічний опис з'явиться автоматично через деякий час. Ви можете підставити цитату власноруч або використовуючи бота. - PMID 4594039 (PMID 4594039)
Бібліографічний опис з'явиться автоматично через деякий час. Ви можете підставити цитату власноруч або використовуючи бота. - PMID 6337396 (PMID 6337396)
Бібліографічний опис з'явиться автоматично через деякий час. Ви можете підставити цитату власноруч або використовуючи бота. - Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. — М.: Мир, 1984. — 480 с.
Вікіпедія, Українська, Україна, книга, книги, бібліотека, стаття, читати, завантажити, безкоштовно, безкоштовно завантажити, mp3, відео, mp4, 3gp, jpg, jpeg, gif, png, малюнок, музика, пісня, фільм, книга, гра, ігри, мобільний, телефон, android, ios, apple, мобільний телефон, samsung, iphone, xiomi, xiaomi, redmi, honor, oppo, nokia, sonya, mi, ПК, web, Інтернет
Rekombinantna DNK angl recombinant DNA angl rDNA molekula DNK otrimana za dopomogoyu metodiv genetichnoyi inzheneriyi molekulyarne klonuvannya Molekula poyednuye v sobi genetichnij material vidilenij z riznih biologichnih dzherel stvoryuyuchi takim chinom pevnu DNK poslidovnist Otrimana takim chinom vektorna DNK mozhe replikuvatis u klitinah gospodaryah Vektorami dlya rekombinantnoyi DNK mozhut buti plazmidi virusi na osnovi drizhdzhovih chi tvarinnih hromosomalnih elementiv Isnuye velika kilkist riznih sistem sho dozvolyayut zdijsnyuvati ekspresiyu privnesenih geniv Okrim zagalnoyi nazvi rekombinantna DNK taku molekulu inodi nazivayut himernoyu DNK V tehnologiyi rekombinantnoyi DNK zagalom vikoristovuyut kotra pislya vidpovidnih manipulyaciyah maye tupi ta lipki kinci Za dopomogoyu tehnologiyi rekombinantnoyi DNK mozhlivo privnesti v genom odnogo organizmu pevnij gen vidilenij z genomu inshogo organizmu stvoryuyuchi takim chinom genetichno modifikovanij organizm Tehnologiya rekombinantnoyi DNK i genetichna rekombinaciya ye riznimi ponyattyami Bilki sintezovani v rezultati ekspresiyi rekombinantnoyi DNK nazivayutsya Inkoli pid chas prisutnosti privnesenoyi molekuli DNK v genomi ekspresiya proteyinu ne vidbuvayetsya V comu vipadku vimagayetsya vikoristannya specifichnih vektornih sistem ta pevnoyi strukturi DNK konstrukciyi prisutnist specifichnih promotoriv terminatoriv tosho IstoriyaVpershe ideya pro stvorennya rekombinantnoyi DNK vinikla u Pitera Lobbana aspiranta profesora Dejla Kajzera z fakultetu biohimiyi pri medichnij shkoli Stenfordskogo universitetu Pershi publikaciyi pro stvorennya ta vdale vikoristannya rekombinantnoyi DNK datovani 1972 ta 1973 rr Pislya cogo Stenfordskij universitet u 1974 r podav zayavku na patent za temoyu Rekombinantna DNK za zgodoyu investoriv Stenli Koena ta Gerberta Boyera Patent buv zatverdzhenij u 1980 r Pershim produktom otrimanim z vikoristannyam tehnologiyi rekombinantnih DNK buv lyudskij insulin stvorenij kompaniyeyu Genetech ta licenzovanim Eli Lilly and Company Tehnologiya stvorennya rekombinantnoyi DNKDlya stvorennya molekuli rekombinantnoyi DNK neobhidno projti dekilka etapiv vidilennya potribnogo cilovogo gena vbudova gena v specifichnu DNK poslidovnist vektor zdatnu do replikaciyi v klitini hazyayevi vvedennya vektora v organizm recipiyent viznachennya skrining ta vidbir klitin v genomi yakih viyavlena prisutnist gena interesu Stvorennya rekombinantnoyi DNK vidbuvayetsya zavdyaki metodu molekulyarnogo klonuvannya Ce ye neosnovnij metod ale najbilsh poshirenij Tozh spochatku za dopomogoyu restriktaz otrimuyut riznogo rodu fragmenti DNK v tomu chisli j poslidovnosti sho koduyut geni Fragmenti DNK mozhut mati yak tupi tak i lipki kinci V rezultati riznomanitni fragmenti DNK mozhlivo kombinuvati mizh soboyu za dopomogoyu riznomanitnih metodiv napriklad metodom restrikcijno ligaznogo metodu en ta in Pislya vvedennya chuzhoridnoyi DNK u genom organizmu gospodarya rekombinantna DNK konstrukciya mozhe ekspresuvatis V deyakih vipadkah ekspresiya ne vidbuvayetsya PrimitkiLear J 1978 Recombinant DNA The Untold Story New York Crown Publishers p 43 PMID 4342968 PMID 4342968 Bibliografichnij opis z yavitsya avtomatichno cherez deyakij chas Vi mozhete pidstaviti citatu vlasnoruch abo vikoristovuyuchi bota PMID 4754844 PMID 4754844 Bibliografichnij opis z yavitsya avtomatichno cherez deyakij chas Vi mozhete pidstaviti citatu vlasnoruch abo vikoristovuyuchi bota PMID 4594039 PMID 4594039 Bibliografichnij opis z yavitsya avtomatichno cherez deyakij chas Vi mozhete pidstaviti citatu vlasnoruch abo vikoristovuyuchi bota PMID 6337396 PMID 6337396 Bibliografichnij opis z yavitsya avtomatichno cherez deyakij chas Vi mozhete pidstaviti citatu vlasnoruch abo vikoristovuyuchi bota Maniatis T Frich E Sembruk Dzh Metody geneticheskoj inzhenerii Molekulyarnoe klonirovanie M Mir 1984 480 s